Characterization of a chromosome rearrangement associated with cardiopathy and autism

Chromosomal rearrangements have been associated with multiple congenital abnormalities, including malformative syndromes and global developmental delay. The aim of this study was identification of candidate genes for a complex phenotype characterized by cardiopathy and autism, identified in an individual with a chromosome translocation t(4;7)(q21.1;p21.2). Since classical and molecular cytogenetic analyses have low resolutions, large-insert whole-genome sequencing (liWGS) was applied for identification and mapping of structural chromosomal alterations. By this approach, the 4q21.1 breakpoint was identified between genomic positions chr4:73,918,924-74,049,529 on 4q13.3, whereas the 7p21.2 breakpoint between chr7:13,184,731-14,536,001 [GRCh38/hg38]; suggesting the occurrence of deletions at both breakpoints. Additionally, a 473Kb deletion on 2p16.3 was also identified in the proband. Nucleotide-level resolution of the breakpoints and familial segregation analysis were carried out by amplification of the junction fragments and Sanger sequencing. At the 4q13.3 breakpoint, the 130Kb deletion erases four genes PF4, PPBP, CXCL5 and CXCL3, whereas at 7p21.2, the 1351Kb deletion removes the entire ETV1 and disrupts DGKB and the long non-coding intergenic (Linc) RNA AC011288.2. Furthermore, at this breakpoint region, genomic array analysis identified in the proband’s father a 742Kb deletion comprising DGKB and ETV but not the LincRNA AC011288.2. The maternally inherited 473Kb deletion on 2p16.3 removes the first 5 exons of NRXN1, a gene associated with Pitt-Hopkins like syndrome (OMIM #614325), susceptibility to schizophrenia and chromosome 2p16.3 deletion (OMIM #614332). Similar deletions have been reported with incomplete penetrance and variable expressivity. Several genes from the 7p21.2 breakpoint region and especially those affected by the deletion, DGKB, ETV1 and LincRNA AC011288.2, have been linked with cognitive, speech, language and auditory disorders. In conclusion, coinheritance of the maternally derived deletion on 2p16.3 and the deletion at the breakpoint of the der(7) on 7p21.2 appear to be the most contributively alterations for the proband’s phenotype. At the time, NRXN1, DGKB, ETV1 and LincRNA AC011288.2 are the most likely genes to be responsible for the proband’s phenotype, being those mainly characterised by cardiopathy and autism

Interdisciplinary programs evaluation methods: a review of literature and a model proposal for intensive projects involving academia and industry

The technological evolution occurred in the last twenty years led organizations to a different global business environment requiring them to be increasingly effective and competitive, implying changes in the way they work. The new paradigm focuses on interdisciplinary team work and so it is required from engineering graduates to have higher levels of transversal competences, like interpersonal communication and team work skills as well as to be able to solve complex engineering problems, in some situations involving areas outside engineers’ common initial training. These changes have clear implications in engineering education and in order to improve engineering education curricula, initiatives like multi and interdisciplinary programs have been implemented in Engineering Schools, with aim to improve the interaction between academia and business companies with win‐win relations. Some of these projects are intensively developed during a short period of time, at the company’s facilities. Along with these initiatives emerges the need to evaluate them. According to the literature, there is a lack of systematic evaluation systems of these projects, so the aim of the paper is to suggest an approach to evaluate interdisciplinary intensive projects, focusing on the competences required by the organizations and considering projects’ stakeholders – participants, tutors, company representatives and educational institutions. The methodology used is based on a literature review of topics related to Project‐Based Learning, aiming to develop a systematic evaluation method that will involve the following dimensions: required outcomes for the participants, competences assessment methods and benefits for stakeholders who participate.This work was partially funded by the Portuguese Foundation for Science and Technology (FCT ‐ Fundação para a Ciência e Tecnologia) with the following project PEST‐OE/EME/UI0252/2011

Generation and characterization of novel adenoviral vectors for hybrid nuclease-mediated gene targeting

Tese de mestrado [versão pública]. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2013Adenovirus-based vectors are among the most efficient and disseminated gene transfer vehicles currently in use in a broad range of basic and applied research applications including the testing of gene therapy. As a gene therapy modality, gene targeting relies on the site-specific genome modification based on “integrases” or on the error-free homologous recombination pathway of the cell. Here, by deploying engineered nucleases together with targeting donor DNA delivered by adenoviral vectors, was tested the influence of the homologous donor topology on the specificity and the accuracy of gene targeting. Was shown clear evidence for the susceptibility of adenoviral vector DNA to the catalytic activities of FLPe recombinase and TALEN proteins. Also, the excision of donor DNA from the context of AdV genomes leads to an increase in stable transduction levels with the majority of integrants having precise HR-derived junctions at both ends, indicating that the vector topology greatly impacts the outcome of the genomic editing process.O domínio científico da terapia genética tem, nos últimos anos, sido alvo de grande expansão e desenvolvimento, sendo descrita como a introdução de nova informação genética, por meio de vetores, em células de um indivíduo com a finalidade de corrigir um defeito no genoma. Muitas dessas correções têm como alvo genes implicados em doenças, como na distrofia muscular de Duchenne, uma doença ligada ao cromossoma X. A ambição de uma cura genética tem impulsionado a descoberta e aperfeiçoamento de ferramentas úteis a essa ciência, tanto na área dos vetores utilizados (nomeadamente os sistemas víricos), como em endonucleases de restrição como as nucleases ZFNs e TALENs. Vetores baseados em adenovírus estão entre os veículos de transferência de genes mais eficientes e são, atualmente, de utilização disseminada. São utilizados numa grande variedade de aplicações de pesquisa básica e aplicada e apresentam características que os distinguem dos restantes sistemas utilizados, como uma eficiente transdução da maioria dos tecidos, uma grande capacidade de acomodação de transgenes e a forma episomal em que o seu genoma permanece na célula, impedindo indesejáveis integrações aleatórias no genoma. Com o consecutivo melhoramento da ciência, também os vetores baseados em adenovírus foram sucessivamente aperfeiçoados, tendo a remoção total ou parcial de genes virais não essenciais, aumentado o tamanho de acomodação do transgene e diminuindo as respostas imunitárias ao vector. Atualmente são descritos essencialmente três tipos de vetores adenovíricos: primeira-geração, segunda- e terceira-geração e high-capacity, com deleções nos genes virais E1, E2/E4 e em todos os genes, respectivamente. Uma das modalidades da terapia genética, a terapia genética targeted, baseia-se na modificação, através de "integrases" ou na via de recombinação homóloga da célula, do genoma numa localização específica, como o locus humano AAVS1, no cromossoma 19, um local largamente utilizado para integração de genes exógenos. A recombinação homóloga é uma via, isenta de erros, de reparação de quebras de ADN utilizada pela célula e é dependente da existência de uma sequência dadora (ADN dador), homóloga em parte com a sequência onde a quebra se deu. Por recombinação entre as duas sequências dá-se troca de informação genética complementar e a correção da quebra. Este sistema é muito utilizado em terapia genética, nomeadamente em sistemas de correção de mutações, mutagénese ou de inserção genética específica. Apesar de ser uma via de reparação eficiente, a célula utiliza mais prontamente uma outra via de reparação: a “non-homologous end joining”, em que, como o nome indica, liga as duas pontas livres, produzindo erros no processo. Para uma terapia genética eficiente e livre de erros, a recombinação homóloga deve ser induzida preferencialmente. Sabe-se que este sistema é recrutado preferencialmente em quebras duplas de ADN e a introdução exógena destas lesões por endonuclases de restrição, como as ZFNs e TALENs, pode aumentar a frequência de ocorrência da recombinação homóloga. Transcription activator-like effectors (TALEs) são proteínas encontradas na bactéria fitopatogénica do género Xanthomonas e que funcionam essencialmente como activadores transcripcionais. A estrutura modular e a sua capacidade de ligação ao ADN numa relação de um-para-um (resíduo-nucleótido) altamente específica fazem com que, associadas à enzima de restrição FokI, tenham dado origem às nucleases TALENs que, após dimerização dos domínios FokI, produzem uma quebra dupla na sequência desejada. As proteínas TALEN podem ser introduzidas na célula eficientemente através de vetores víricos como os vetores adenovíricos. No presente trabalho, através da transferência de TALENs (específicas para o locus AAVS1 humano) e de ADN dador, por vetores adenovíricos de segunda-geração, foi testada a influência da topologia do ADN dador homólogo sobre a especificidade e a precisão da terapia genética targeted. Os dadores homólogos foram construídos numa base genómica adenovírica, com duas sequências homólogas ao locus AAVS1, flanqueando o transgene eGFP direcionado por um promotor PGK. As topologias finais dos dadores foram produzidas a partir de reacções em sequências clonadas: flipase recognitition target (FRT), TALEN-target site (T-TS) e adeno-associated virus inverted terminal repeat (AAV-ITR). Pela recombinação das sequências FRT, mediada pela recombinase flipase, resultou um dador circular; pela libertação do dador do contexto adenovírico, mediado pela quebra dupla por TALENs nas sequências T-TS, foi produzido um dador linear e pelas sequências AAV-ITR, foi produzido um dador com estruturas secundárias terminais com recrutamento de fatores de reparação. Após aquisição da topologia final, e por quebra dupla específica no locus AAVS1 mediada pelas TALENs, a via de recombinação homóloga será recrutada, levando à recombinação entre as sequências homólogas no locus e no ADN dador e, consequentemente, à integração do transgene. Após a caracterização dos vetores por análise enzimática de restrição, demonstrou-se evidências da suscetibilidade do ADN vetor dador para as atividades catalíticas da flipase e das proteínas TALEN através de técnicas de PCR. A atividade de transferência dos dadores pelos vetores adenovirais foi determinada por titulações em células Hela, após as quais se procedeu às experiências de transdução, tanto em células HeLa como em mioblastos derivados de pacientes com distrofia muscular de Duchenne. No sentido de investigar a especificidade e precisão da recombinação, mediada por TALENs, dos diferentes dadores no locus-alvo AAVS1, a frequência de células positivas para eGFP foi monitorizada por citometria de fluxo ao longo do período de tempo em que as células transduzidas foram mantidas em cultura. Observou-se na primeira experiência de transdução, em células HeLa, que apesar dos elevados níveis iniciais de células positivas para eGFP, essas frequências rapidamente diminuiram e, após 28 dias, foram consideradas como níveis basais em todas as condições à excepção das células transduzidas com o dador linear (com sequências T-TS) em combinação com as TALEN. Esta condição apresentou 1.7 vezes maior frequência de células positivas para eGFP que o dador controlo. O período da experiência foi suficiente para diluir as formas episomais do vetor, sendo este valor final resultado da integração genómica do transgene. Uma segunda experiência de transdução em células HeLa, neste caso utilizando somente o dador linear (T-TS) e as TALENs, confirmou os resultados da experiência inicial. Uma última experiência de transdução foi feita, utilizando mioblastos derivados de pacientes de Duchenne e, para além do dador linear T-TS, um dador normal para comparação. Igualmente nesta experiência, o dador linear em combinação com as TALEN revelou uma frequência de células positivas para eGFP mais elevada que o dador controlo. Porque um aumento nos níveis de eficiência de integração do transgene não demonstra directamente um equivalente aumento na especificidade, procedeu-se a uma avaliação desse parâmetro por experiências de PCR. Para isso, isolaram-se clones de células HeLa da primeira experiência, positivos para eGFP, da condição do dador linear T-TS em combinação com as TALEN. Primers foram desenhados de forma a ser avaliada a integração do transgene, tanto na extremidade 5’ como na 3’ do locus-alvo AAVS1, assim como primers para o gene eGFP como controlo interno. Em 30 clones isolados, somente 22 clones (73%) revelaram junções do locus provenientes de recombinação homóloga. Com base nos resultados deste trabalho pode-se afirmar que o contexto do vetor influencia a especificidade e a precisão do processo de edição genético. Comparação com outros sistemas víricos poderá levar ao desenvolvimento de ferramentas e sistemas mais eficientes e seguros para o campo da terapia genética

Customer relationship management at Sport Lisboa e Benfica: football customer segmentation

The purpose of this study is to consolidate the knowledge and learning from the field lab at SL Benfica and propose a conceptual framework for customer-based lifecycle segmentation that suits the club’s needs and its customer base. Relevant customer relationship management and segmentation literature was reviewed and served as the basis for the proposed segmentation method supported by 78 qualitative semi-structured interviews with Benfica supporters. Benfica needs to improve its targeting and marketing efforts and realize the true potential behind certain segments of customers within its database by applying a customer-based lifecycle segmentation technique as proposed in this study

O público vai ao Teatro: uma etnografia dos públicos em ação

A partir de um desafio lançado pelo Teatro Municipal de Lisboa, as companhias de teatro independente do Porto foram convidadas a organizar a programação daquela instituição durante um mês. Uma jovem companhia portuense respondeu ironicamente com a apresentação do projeto “O Público Vai ao Teatro”. Tal projeto consistia em promover uma performance que parodiava uma excursão folclórica dos públicos provincianos do Porto à capital, antecedida de vários workshops de familiarização com os códigos da linguagem teatral. A pesquisa sociológica consistiu em, através da investigação-ação de cariz etnográfico, analisar e mediar modos de relacionamento com a cultura e com as instituições teatrais por parte das pessoas recrutadas. Este artigo faz uma primeira avaliação do projeto, não incluindo ainda a sessão final, a partir de um diagnóstico das representações dessa população sobre os seus modos de relação com o teatro.Challenged by Teatro Municipal de Lisboa, independent theatre companies from Oporto were invited to organize that institution’s programming throughout a month. “The public goes to the theatre” was the ironic response of a young company from Oporto to the challenge. This project aimed to promote a performance, a folk parody excursion that would lead the provincial public of Oporto to the capital, a journey preceded by several workshops to help them familiarize with theatrical language codes. Via research-action-oriented ethnographic methods, the sociological research intended to analyze and mediate the recruited individual’s relationship with culture and theater institutions. This article draws a preliminary assessment of the project, not including the final session, a diagnosis based on the population’s representations and theater relation approach.À partir d’un défi lancé par le Théâtre Municipal de Lisbonne, les compagnies de théâtre indépendant de Porto ont été invitées à préparer la programmation de cette salle pendant un mois. Une jeune compagnie de Porto a répondu sur le ton de l’ironie en présentant le projet “ Le Public va au Théâtre ”: une performance qui parodiait une excursion folklorique des publics provinciaux de Porto à la capitale, précédée de plusieurs ateliers de familiarisation aux codes du langage théâtral. La recherche sociologique, menée au travers de l’enquête-action de nature ethnographique, a consisté à identifier et à analyser les rapports des personnes recrutées avec la culture et avec les compagnies théâtrales. Cet article propose une première évaluation du projet, sans inclure la séance finale, à partir d’un diagnostic des représentations de cette population sur son rapport au théâtre.A partir de un desafío lanzado por el Teatro Municipal de Lisboa, las compañías de teatro independiente de Porto fueron invitadas a organizar la programación de aquella institución durante un mes. Una joven compañía de Porto respondió irónicamente con la presentación del proyecto “El público va al teatro”. Tal proyecto consistía en promover un performance que parodiaba una excursión folclórica de los públicos provincianos de Porto a la capital, antecedida de varios workshops de familiarización con los códigos del lenguaje teatral. La investigación sociológica ha consistido en una de investigación-acción de tipo etnográfico, analizar y mediar modos de relacionamiento con la cultura y con las instituciones teatrales por parte de las personas reclutadas. Este artículo hace una primera evaluación del proyecto, sin incluir la sesión final), a partir de un diagnóstico de las representaciones de esa población sobre sus modos de relación con el teatro

RNA-SEQ applied to the peacock blenny Salaria pavo: unveiling the gene networks and signalling pathways behind phenotypic plasticity in a littoral fish

Phenotypic plasticity is the ability of an individual genome to produce different phenotypes depending on environmental cues. These plastic responses rely on diverse genomic mechanisms and allow an organism to maximize its fitness in a variety of social and physical settings. The development of next-generation sequencing (NGS) technologies, especially RNA Sequencing (RNA-Seq), has made it possible to investigate the distinct patterns of gene expression known to be underlying plastic phenotypes in species with ecological interest. In teleost fishes, changes in phenotypes is often observed during the reproductive season, with shifts and adjustments in dominance status that can lead to the co-existence of multiple reproductive morphs within the same population. One such example is the peacock blenny Salaria pavo (Risso, 1810), a species where the intensity of mating competition varies among populations due to nest-site availability, such that two different levels of plasticity arise: 1) intraspecific variation in reproductive behaviour for males that can follow either of two developmental pathways, grow directly into nest-holder males, or behave first as female mimics to sneak fertilizations (sneaker males) and later transition into nest-holder males, and 2) inter-population variation in courting roles of females and nest-holder males. This system provides the ideal basis to apply RNA-Seq methods to study plasticity since differences in reproductive traits within and among populations can reveal which genetic and genomic mechanisms underpin the observed variation in behavioural response to changes in the social environment. However, the genomic information available for this species was scarce, and hence multiple sequencing techniques were used and the methodologies applied optimized throughout the work. In this thesis, we start by first obtaining a de novo transcriptome assembly to develop the first genetic markers for this species (Chapter 2). These microsatellites were used to elucidate the reproductive success (i.e. consisting of mating success and fertilization success) of male ARTs, which can be used as a proxy of Darwinian fitness (Chapter 3). In this study, we detected a fertilization success for nestholder males of 95%, and showed a stronger influence of the social environment rather than morphological variables in the proportion of lost fertilizations by nest-holder males of this species. Taking advantage of the developed transcriptome, we used highthroughput sequencing to obtain expression profiles for male morphs (i.e. intraspecific variation) and females in this species, and focus on the role of differential gene expression in the evolution of sequential alternative reproductive tactics (ARTs) that involve the expression of both male and female traits (Chapter 4). Additionally, we show how the distinct behavioural repertoires are facilitated by distinct neurogenomic states, which discriminate not only sex but also male morphs. Lastly, using two different target tissues, gonads and forebrain, we focus on the genomic regulation of sex roles in courtship behaviour between females and males from two populations under different selective regimes (inter-population variation), the Portuguese coastal population with reversed sex roles and the rocky Italian population with ‘conventional’ sex roles (Chapter 5). Here we demonstrate that variation in gene expression at the brain level segregates individuals by population rather than by sex, indicating that plasticity in behaviour across populations drives variation in neurogenomic expression. On the other hand, at the gonad level, variation in gene expression segregates individuals by sex and then by population, indicating that sexual selection is also acting at the intrasexual level, particularly in nestholder males by paralleling differences in gonadal investment. However, the genomic mechanisms underlying courtship behaviour were not fully elucidated, and more studies are necessary.A plasticidade fenotípica consiste na capacidade de o mesmo genoma produzir diferentes fenótipos comportamentais dependendo das pistas ambientais recebidas. Estas respostas plásticas dependem de diversos mecanismos genómicos e permitem que o indivíduo maximize a sua fitness (aptidão) numa variedade de ambientes ecológicos. O desenvolvimento verificado nas tecnologias de sequenciação de alto desempenho ao longo da última década, globalmente denominadas de “Next Generation Sequencing” (NGS), permitiu o estabelecimento de métodos de análise e ferramentas genómicas que podem ser aplicadas em todos os sistemas ecológicos de interesse em biologia, sem a existência prévia de um genoma curado. Nomeadamente a tecnologia de sequenciação de ARN, conhecida globalmente como RNA-Seq, tornou possível a investigação dos perfis de expressão génica que se sabe serem determinantes na emergência de fenótipos plásticos, e consequentemente permitem determinar fenótipos em estados distintos de expressão genómica. Em peixes teleósteos, é possível observar com frequência modificações no fenótipo comportamental durante o período de reprodução, como por exemplo alterações e ajustes no estatuto de dominância que podem levar à coexistência de indivíduos que apresentam diferentes táticas de reprodução dentro da mesma população. Um desses exemplos é o peixe marachomba-pavão Salaria pavo (Risso, 1810), onde a intensidade na competição intra e intersexual varia entre populações sendo modulada pela disponibilidade de locais de nidificação, de forma a que dois níveis diferentes de plasticidade surgem: 1) variação intraespecífica no comportamento reprodutivo em machos que podem seguir uma de duas vias de desenvolvimento, investirem no seu crescimento e tornarem-se machos nidificantes na sua primeira época de reprodução, ou primeiro seguir uma tática de macho parasita onde investem em fertilizações furtivas, sendo que mais tarde no seu desenvolvimento fazem a transição para macho nidificante, e 2) variação interpopulacional nos papeis de corte de fêmeas e machos nidificantes. Os machos parasitas, conhecidos nesta espécie como “sneakers”, possuem uma particularidade que os tornam singulares, para além de imitarem a morfologia das fêmeas também conseguem imitar o seu comportamento de corte direcionado ao macho nidificante, o que lhes permite aproximarem-se discretamente dos ninhos dos machos e fertilizar parte dos ovos que as fêmeas depositam. Este sistema constitui a base ideal para aplicar métodos de RNA-Seq e estudar esta plasticidade fenotípica, uma vez que diferenças nas características reprodutivas dentro e entre populações podem revelar quais os mecanismos genéticos e genómicos subjacentes à variação observada em resposta a mudanças no ambiente ecológico. No entanto, a informação genómica disponível nesta espécie é reduzida e, por isso diferentes técnicas de sequenciação, assim como diferentes métodos de análise foram usados e otimizados ao longo deste trabalho. A presente tese é constituída por quatro trabalhos, sendo que no primeiro estudo se começa pela sequenciação de uma biblioteca de ARN proveniente de uma mistura de múltiplos indivíduos e de tecidos, de forma a captar a diversidade genética e desenvolver os primeiros marcadores genéticos nesta espécie (Capítulo 2). Com base nestes marcadores, microssatélites polimórficos, foi possível genotipar uma fração dos indivíduos da população existente na Ilha da Culatra (Ria Formosa, Portugal) bem como os ovos retirados de ninhos alvo, de forma a fazer análises de paternidade (Capítulo 3). Neste estudo, foi possível estimar o sucesso de fertilização de ovos de cada uma das táticas alternativas de reprodução, e usá-la como medida representativa de fitness de cada tática alternativa de reprodução nesta espécie. Os resultados indicam um sucesso de fertilização para os machos nidificantes de 95%, e mostramos que existe uma maior influência do ambiente social do que de variáveis morfológicas na proporção de fertilizações não obtidas pelos machos nidificantes, quando comparado com estudos anteriores. Usando o transcriptoma obtido no primeiro trabalho, avançámos com a caraterização genómica de cada um dos fenótipos presentas na população da ilha da Culatra, fêmeas, machos nidificantes, machos sneakers e machos de transição (machos que apenas investem no seu crescimento, não se reproduzindo, e consequente transição de sneaker para macho nidificante) (Capítulo 4). Para tal, foi sequenciado em profundidade o transcriptoma de cérebro de cada um deste fenótipos, e os perfis de expressão obtidos para machos e fêmeas desta espécie, onde o foco do estudo se centrava no papel da expressão génica diferencial na evolução de táticas reprodutivas alternativas sequenciais que envolvem a expressão de ambos os traços masculinos e femininos. Os resultados obtidos, mostram como repertórios comportamentais distintos são facilitados por estados neurogenómicos distintos, que discriminam não apenas o sexo, mas também as táticas alternativas de reprodução. Por fim, utilizando dois tecidos-alvo, gónadas e prosencéfalo, focámo-nos na regulação genómica dos papeis sexuais no comportamento de corte entre fêmeas e machos nidificantes de duas populações sob diferentes regimes seletivos, a população costeira portuguesa com papeis sexuais invertidos e a população rochosa italiana, com papeis sexuais ‘convencionais’ (Capítulo 5). Os resultados obtidos mostram que ao nível do cérebro, a variação na expressão génica segrega os indivíduos por população e não por sexo, indicando que a plasticidade no comportamento entre as populações induz uma maior variação na expressão neurogenómica. Por outro lado, ao nível das gónadas, a variação na expressão génica segrega os indivíduos por sexo e também por população, indicando que a seleção sexual está a atuar ao nível intrasexual, particularmente nos machos nidificantes, indo de encontro a diferenças detetadas entre populações no investimento alocado às gónadas. No entanto, os mecanismos genómicos subjacentes ao comportamento de corte não foram totalmente elucidados, e mais estudos são necessários.The work presented here was developed at Instituto Gulbenkian de Ciência (IGC) in Oeiras, with the support of both ISPA – Instituto Universitário in Lisbon, for the maintenance of live fish, and Centro de Ciências do Mar (CCMAR) at Universidade do Algarve, for logistics and support during fieldwork in Ria Formosa

University teachers' digital competence: a case study from Portugal

Abstract It has become increasingly important to train for an educational culture that makes use of digital technology to enhance its practices. Frameworks such as DigCompEdu enable identification of weaknesses and areas which require more training. This paper presents the results of a case study with 249 participants from a Portuguese University examining differences in the digital competence of teachers according to gender, age, faculty and experience. Based on the data obtained, it was found that there were no significant differences and that it was, therefore, more important to consider training for digital empowerment according to the different areas of the DigCompEdu framework and to address weaknesses found in each of these areas

HIV AIDS Length of Stay Outliers

AbstractCosts with HIV/AIDS hospitalizations are one of the major financial burdens on healthcare systems worldwide. In Portugal, hospitalizations related to HIV infection are some of the most expensive and the second major diagnosis category, and also accounts for the greatest average length of stay. As a result, it is crucial to understand and identify HIV/AIDS hospital length of stay outliers. The objective of this study is to analyse HIV/AIDS length of stay high outliers during five consecutive years (2009-2013) and to identify its determinants for a specific HIV/AIDS diagnosis related group. To attain these objectives we will use a logistic regression model with random effects